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RT-PCR

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  RT- PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)即逆转录PCR,是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(PCR)相结合的技术。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。

  RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR可以用于定量监测某种RNA的含量,检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。

  操作流程

  1.从细胞或特定组织中提取总RNA;

  2.逆转录实验;

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