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细胞培养

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  细胞培养

  细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。

  细胞培养技术优点

  1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究.

  2.直接观察细胞的变化可便于摄影。

  3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。

  4.便于使用各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。

  5.是分子生物学和基因工程学的研究对象,也是其主要的组成部分。

  6.易于施用物理、化学生物的实验研究。

  7.易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。

  8.成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。

  细胞培养技术缺点

  组织和细胞离体后独立生存在人工的培养环境中,虽然模拟体内环境,仍有很大差异。因而利用培养细胞做实验时,不应视为体内细胞完全相同,把实验结果推测体内,轻易做出与体内等同的结论。

  细胞培养类型

  细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性,分为贴附型和悬浮型。

  贴附型:细胞贴附在支持物表面生长,只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。

  贴附型细胞的分型

  1.成纤维型细胞:(fibroblast) 来自中胚层

  特点:与体内成纤维细胞形态相似,胞体梭型或不规则三角形,中央有圆形核,胞质向外伸出2~3个长短不同的突起。细胞在生长时呈放射状,漩涡或火焰状走行。

  起源:细胞来自中胚层间充质组织。

  如真正的成纤维细胞、心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮细胞。

  注意:细胞在培养时成为成纤维型细胞是一种惯称,与体内细胞不同。

  2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层。

  特点:扁平不规则多角型、圆形核、细胞紧密相连成细胞增殖数目增多时,整个上皮膜随之移动。边缘细胞很少脱离细胞群而单独活动“拉网”现象与起源内外胚层组织有关。

  组织: 皮肤表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。

  3. 游走型细胞(wandering cell type)

  特点:在支持物上散在生长,不连接成片,胞质伸出伪足或突起呈活跃的游走或变形运动,速度快不规则, 密度大连接成片呈多角形不易与其他类型的细胞区别。

  4. 多形型细胞(polymorphic cell type)

  特点:无规律的形态,如神经细胞。

  悬浮型:不贴附在支持物生长,胞体圆形,在培养液中生长空间大,可长时间的生长,繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。如S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL-60。

  分型的目的:

  方便描述细胞在培养过程中的形态变化。培养条件好时,细胞相对稳定,可反映出起源、正常异常的区别,作为判定细胞生物学性状指标。

  强调:一般形态并不是一项可靠指标,要受各方面影响。

  如:反复开关温箱、温度、C02的浓度、培养基变碱、支原体、pH值。细胞在接种时呈三角型状态,经培养一定时间后,细胞在传代前已形成上皮型细胞。

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